O que é (Finalidade)

Meio indicado para a identificação de bacilos entéricos Gram-negativos com base na fermentação de dextrose (glicose), lactose e sacarose, na produção de H₂S e de gás. Empregado em rotinas de diagnóstico e em ensaios com Enterobacteriaceae (recomendação também presente em farmacopéias).

Princípio do teste

• Peptona, extratos de carne e levedura fornecem compostos nitrogenados, fatores de crescimento e vitaminas.
• Lactose (10 g/L), sacarose (10 g/L) e dextrose monoidratada (1 g/L) são as fontes fermentáveis de carboidratos.
• Tiossulfato de sódio (com íons férricos/ferrosos) compõe o sistema indicador de H₂S (formação de sulfeto ferroso preto).
• Vermelho de fenol indica variação de pH: vermelho (alcalino), amarelo (ácido).
• Cloreto de sódio mantém o equilíbrio osmótico; ágar solidifica (formato de tubo inclinado “slant” com fundo “butt”).

A fermentação de dextrose (baixa concentração) acidifica primeiramente o butt, enquanto o slant tende a reverter para alcalino pela oxidação de peptonas. Fermentação de lactose e/ou sacarose (altas concentrações) mantém slant e butt ácidos. Gás é evidenciado por fendas/bolhas no meio. A redução de tiossulfato com íons férricos/ferrosos gera precipitado preto de FeS (H₂S positivo), geralmente no butt.

Composição (g/L)

• Beef extract — 3,000
• Peptone — 20,000
• Yeast extract — 3,000
• Lactose — 10,000
• Sucrose — 10,000
• Dextrose monohydrate — 1,000
• Ferrous sulphate — 0,200
• Sodium chloride — 5,000
• Sodium thiosulphate — 0,300
• Phenol red — 0,024
• Agar — 12,000

Preparo (Instruções de uso)

1. Dissolver 64,42 g do pó em 1000 mL de água destilada.
2. Aquecer até fervura para dissolução completa; homogeneizar e distribuir em tubos.
3. Autoclavar a 15 lb (aprox. 115 °C) por 30 minutos (ou conforme ciclo validado).
4. Deixar solidificar em posição inclinada para formar o “slant”, garantindo um butt ~2,5 cm.

Aspeto do meio preparado: gel vermelho-rosado, claro a levemente opalescente.

Leitura & Interpretação

• K/A (slant alcalino vermelho / butt ácido amarelo): fermenta apenas dextrose.
• A/A (slant e butt ácidos amarelos): fermenta dextrose + lactose e/ou dextrose + sacarose (ou os três açúcares).
• Gás: bolhas/fendas no meio.
• H₂S positivo: blackening (precipitado preto), geralmente no butt.

Observação: algumas Enterobacteriaceae e Salmonella produtoras de H₂S podem não se mostrar positivas em TSI, ou exibir H₂S em Kligler e não em TSI (utilização de sacarose pode suprimir vias enzimáticas de H₂S). Recomenda-se uso paralelo de Urea Agar/Caldo para diferenciar Salmonella de Proteus.

Qualidade & Especificações (QC)

• Pó desidratado: amarelo-claro a rosado, homogêneo, livre-escoante.
• Meio preparado: vermelho-rosado, claro a levemente opalescente.
• pH (25 °C): 7,4 ± 0,2.

Características culturais (18–24 h; 35–37 °C)

Aplicações e boas práticas

• Triagem/identificação presuntiva de Enterobacteriaceae em rotina clínica e de qualidade.
• Recomendado executar em paralelo com Urease (Urea Agar/Caldo) na diferenciação de Salmonella e Proteus.
• Interpretar sempre em conjunto com outros testes bioquímicos e perfil do isolado.

Apresentação

• Frascos de 500 g.

Armazenamento & Validade

• Pó desidratado (higroscópico): armazenar seco, em recipiente bem fechado, entre 25–30 °C, protegido de luz solar direta.
• Validade: até 4 anos em condições ideais.
• No primeiro uso, anotar data e hora no rótulo; após retirar a quantidade desejada, fechar imediatamente para evitar hidratação.
• Não utilizar em caso de contaminação, descoloração, ressecamento ou outros sinais de deterioração.

Segurança (FDS) & Descarte

• Classificação de perigo (CLP/UE): não classificado como perigoso; sem rotulagem obrigatória.
• Componentes traço com classificação: ferrous sulphate (H302, H319) e phenol red (H315, H319, H335) em baixas concentrações.
• Primeiros socorros: lavar pele/olhos com água; remover para local arejado se inalação; não dar nada por via oral a inconscientes; procurar atendimento médico quando necessário.
• PPE: óculos de segurança e luvas; evitar contato com pele/olhos e inalação de poeira; boas práticas de laboratório.
• Armazenamento (segurança): local fresco, seco e ventilado; recipiente bem fechado; 10–25 °C recomendado no recebimento.
• Transporte: não perigoso (ADR/IATA/IMDG).
• Descarte: esterilizar materiais/placas após uso; descartar conforme regulamentação local.

FAQ