Agar Citrato Simmons, 500G
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TM 348 – Simmons Citrate Agar
O que é (Finalidade)
Meio para diferenciação de Enterobacteriaceae pela utilização de citrato como única fonte de carbono. Empregado nos esquemas IMViC e em rotinas de identificação para distinguir microrganismos que utilizam citrato daqueles que não utilizam.
Princípio do método
O meio contém citrato de sódio como única fonte de carbono e fosfato de amônio como única fonte de nitrogênio. Microrganismos capazes de metabolizar esses componentes geram alcalinização do meio, o que é indicado pela mudança do bromotimol azul de verde para azul. A formulação em ágar permite o preparo em tubos com “slants”.
Observações importantes: preparar o meio fresco, pois em condições de ressecamento podem ocorrer alterações de cor no fundo do “slant” mesmo antes da inoculação. Antes de usar a água, verifique o pH (6,5–7,0); desvios podem alterar a coloração inicial esperada.
Composição (g/L)
- Magnesium sulphate – 0,200
- Ammonium dihydrogen phosphate – 1,000
- Dipotassium phosphate – 1,000
- Sodium citrate – 2,000
- Sodium chloride – 5,000
- Bromothymol blue – 0,080
- Agar – 15,000
Preparo (Instruções de uso)
- Dissolver 24,28 g em 1000 mL de água purificada/destilada.
- Aquecer até ebulição para dissolver completamente; homogeneizar bem e distribuir em tubos/frascos.
- Autoclavar a 121 °C (15 psi) por 15 minutos.
- Precaução: assegurar que a água esteja com pH 6,5–7,0 antes do preparo.
Aspecto inicial esperado: gel verde-floresta, levemente opalescente, formado como “slants” nos tubos.
Qualidade & desempenho (QC)
- Pó desidratado: creme a amarelo, homogêneo, livre-escoante.
- Meio preparado: gel verde-floresta, levemente opalescente.
- pH (25 °C): 6,8 ± 0,2.
| Micro-organismo (ATCC) | Inóculo (CFU/mL) | Crescimento | Utilização de citrato | Temperatura | Tempo |
|---|---|---|---|---|---|
| Klebsiella aerogenes 13048 | 50–100 | Bom–luxuriante | Positiva, coloração azul | 35–37 °C | 18–24 h |
| Escherichia coli 25922 | ≥103 | Inibida | Negativa | 35–37 °C | 18–24 h |
| Salmonella Typhi 6539 | 50–100 | Razoável–boa | Negativa, coloração verde | 35–37 °C | 18–24 h |
| Salmonella Typhimurium 14028 | 50–100 | Bom–luxuriante | Positiva, azul | 35–37 °C | 18–24 h |
| Shigella dysenteriae 13313 | ≥103 | Inibida | Negativa | 35–37 °C | 18–24 h |
| Salmonella Choleraesuis 12011 | 50–100 | Bom–luxuriante | Positiva, azul | 35–37 °C | 18–24 h |
| Salmonella Enteritidis 13076 | 50–100 | Bom–luxuriante | Positiva, azul | 35–37 °C | 18–24 h |
Interpretação
- Positiva (utiliza citrato): crescimento com viragem de verde para azul.
- Negativa (não utiliza citrato): ausência de crescimento e manutenção da cor verde.
Apresentação
- Frascos de 500 g.
Armazenamento & Validade
- Pó desidratado (higroscópico): armazenar seco, bem fechado, 25–30 °C, protegido da luz solar direta.
- Validade: até 4 anos em condições ideais.
- Ao primeiro uso, anotar data e hora no rótulo; após retirar a quantidade desejada, fechar imediatamente para evitar hidratação.
- Não utilizar em caso de contaminação, descoloração, ressecamento ou outros sinais de deterioração.
Descarte & Segurança
- Após o uso, esterilizar placas/tubos e materiais contaminados antes do descarte.
- De acordo com a FDS, o produto não é classificado como perigoso pelo Regulamento (CE) n.º 1272/2008 (CLP).
- Usos identificados: químicos de laboratório (análise bioquímica, IVD). Utilizar EPIs e boas práticas de laboratório.
- Armazenamento (segurança – FDS): local fresco, seco e ventilado; recipiente bem fechado (recomendado 10–25 °C na recepção).
FAQ
Por que meu tubo ficou azulado sem inocular?
Alterações de cor podem ocorrer em “slants” ressecados. Prepare o meio fresco e controle o pH da água (6,5–7,0) antes do preparo.
Qual é o critério para resultado positivo?
Crescimento acompanhado de viragem do indicador para azul indica utilização de citrato.
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