7240-90-6 5-Bromo-4-cloro-3-indolil-β-D-galactopiranosídeo

7240-90-6 5-Bromo-4-cloro-3-indolil-β-D-galactopiranosídeo ou (5-Bromo-4-Chloro-3-Indolyl Β-D-Galactopyranoside)

Sinônimo(s):
5-Bromo-4-chloro-3-indolyl β-D-galactoside, BCIG, X-Gal
Fórmula empírica (Notação de Hill):C14H15BrClNO6
Nº CAS: 7240-90-6
Peso molecular: 408.63
Beilstein: 1402009
Nº CE: 230-640-8
Nº MDL: MFCD00005666
ID de substância PubChem: 24891761

5-Bromo-4-Chloro-3-Indolyl Β-D-Galactopyranoside, comumente conhecido como X-Gal, é um composto químico usado em biologia molecular como um substrato cromogênico para a detecção da atividade da β-galactosidase. Quando a β-galactosidase cliva a X-Gal, ela produz um precipitado azul insolúvel, que pode ser detectado visualmente. Essa propriedade torna a X-Gal útil em vários ensaios, incluindo a triagem azul-branca de bactérias recombinantes. Aqui estão mais alguns detalhes sobre sua aplicação e propriedades:

Aplicações:
Triagem azul-branca: X-Gal é usado em conjunto com IPTG (Isopropil β-D-1-tiogalactopiranosídeo) para rastrear colônias bacterianas que absorveram com sucesso um plasmídeo contendo o gene de interesse. Bactérias que expressam β-galactosidase tornam-se azuis quando cultivadas em meios contendo X-Gal, permitindo fácil diferenciação de colônias brancas que não expressam a enzima.
Ensaios de gene repórter: É usado em ensaios de gene repórter para detectar atividade de β-galactosidase em vários sistemas.

Propriedades:
Fórmula química: C14H15BrClNO6
Peso molecular: 408,64 g/mol
Aparência: Pó branco a esbranquiçado
Solubilidade: Solúvel em dimetilformamida (DMF) e dimetilsulfóxido (DMSO)

Mecanismo:
Clivagem do substrato: β-galactosidase cliva a ligação glicosídica em X-Gal.
Formação de precipitado azul: A clivagem resulta na liberação de 5-bromo-4-cloro-3-hidroxiindol, que subsequentemente sofre oxidação e dimerização para formar um pigmento azul insolúvel.
O uso deste composto em ambientes laboratoriais é crucial para várias aplicações genéticas e de biologia molecular, particularmente na identificação e caracterização de clones recombinantes.