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298-83-9 Azul De Nitrotetrazolio Cloreto ou (Nitrotetrazolium Blue Chloride)
Sinônimo(s):
Cloreto de p-nitroazul de tetrazólio, p-Nitrotetrazólio azul, Cloreto de 2,2′-bis(4-nitrofenil)-5,5′-difenil-3,3′-(3,3′-dimetoxi-4,4′-difenileno)ditetrazólio, Cloreto de 3,3′-(3,3′-dimetoxi-4,4′-bifenileno)bis[2-(4-nitrofenil)-5-fenil-2H-tetrazólio], NBT, Nitro BT
Fórmula linear:
C40H30N10O6 · 2Cl
Nº CAS: 298-83-9
Peso molecular: 817.64
Beilstein: 4115923
Nº MDL: MFCD00012159
ID de substância PubChem: 24897795
NACRES: NA.47
Cloreto de azul de nitrotetrazólio (NTB ou NBT) é um composto químico usado principalmente como reagente em pesquisas bioquímicas, particularmente em ensaios envolvendo atividade desidrogenase. É frequentemente utilizado na detecção da atividade enzimática e para visualizar a presença de certos substratos ou produtos em vários ensaios biológicos.
Propriedades principais:
Fórmula química: C40H30Cl2N10O6
Peso molecular: Aproximadamente 817,65 g/mol
Aparência: NBT é tipicamente um sólido amarelo que fica azul após a redução.
Usos em Pesquisa Bioquímica:
Detecção da Produção de Superóxido:
O NBT é comumente usado em ensaios para detectar a produção de radicais superóxido nas células. Quando radicais superóxido estão presentes, eles reduzem o NBT a um produto formazan azul escuro, que pode ser observado visualmente ou medido quantitativamente.
Ensaios de atividade enzimática:
É usado para visualizar e medir a atividade de várias desidrogenases. Nesses ensaios, o NBT é reduzido a uma formazana de cor azul pela ação da enzima, fornecendo um meio de rastrear a atividade enzimática.
Coloração histoquímica:
O NBT pode ser usado em técnicas de coloração histoquímica para localizar e visualizar a atividade enzimática em cortes teciduais. Esta aplicação é particularmente útil no estudo de atividades metabólicas em diferentes tecidos.
Manuseio e Segurança:
Armazenamento: O NBT deve ser armazenado em local fresco e seco, protegido da luz para evitar a degradação.
Segurança: Tal como acontece com muitos reagentes químicos, devem ser tomadas medidas de segurança adequadas ao manusear o NBT. Pode ser prejudicial se inalado ou ingerido e pode causar irritação na pele ou nos olhos. Use luvas, roupas de proteção e proteção ocular ao manusear o composto.
Exemplo de protocolo:
Um protocolo comum envolvendo NBT é o ensaio NBT para produção de superóxido:
Preparar uma mistura de reacção contendo a amostra, NBT e um tampão apropriado.
Incubar a mistura a uma temperatura específica por um período definido.
Monitorar visualmente o desenvolvimento do produto azul formazana ou usando um espectrofotômetro para medir a absorbância em um comprimento de onda de 560 nm.
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